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Transwell細胞侵襲

簡要描述:Transwell細胞侵襲實驗的實驗步驟:配制結晶紫染液 transwell侵襲孔的制備 細胞離心 下室加培養基 上室接種細胞染色。

  • 更新時間:2022-12-22
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詳細介紹

Transwell細胞侵襲作為一項實驗技術,其主要材料是transwell小室,其外形為一個可放置在孔板里的小杯子,杯子底層有一張具有通透性的膜,這層膜帶有微孔,孔徑大小從01-12um不等。根據不同需要有不同材料,般常用的是聚碳酸酯膜。將transwell小室放入培養板中,小室內稱為上室,培養板內稱為下室。上室裝上層培養液,下室內裝下層培養液,二者以transwel小室底部的聚碳酸酯膜相隔。細胞種在 上室可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。運用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜,可以進行細胞共培養、細胞趨化、細胞遷移細胞侵襲等各種研究。

Transwell細胞侵襲實驗
常用8.0、12.0um孔徑的膜,原理與transwell遷移實驗類似。上室種細胞(一般為腫瘤細胞),下室加入FBS或者某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室運動。但是與遷移實驗不同的是,本實驗中聚碳酸酯膜上室側鋪有層基質膠 ,用以模擬體內細胞外墓質 細胞要想穿過透性膜進入下室 ,需要先分泌基質金屬蛋白酶( MMPS )將基質膠降解,方能通過聚 碳酸酯膜。對進入下室的細胞進行計數即可反應細胞的侵襲能力。

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